Окраска осп: Чем покрасить OSB плиту снаружи и внутри дома?

особенности покраски, процесс и способы декорирования

В современном строительстве при проведении различных наружных и внутренних работ широко применяется ориентировано-стружечная плита OSB или ОСБ. Это обусловлено высокими техническими и эксплуатационными характеристиками материала, а также его доступной ценой. Поверхность плиты не отличается эстетичностью, поэтому при необходимости её декорируют, в основном путем окрашивания. В данной статье эксперты HouseChief расскажут, чем и как покрасить ОСБ-плиты, что нужно сделать перед нанесением лакокрасочных материалов и многое другое.

Читайте в статье

• 1 Особенности ОСБ-плит, влияющие на выбор краски
• 2 Какие краски применяются для покраски OSB-плит
  • 2.1 Составы для наружных работ
  • 2.2 Составы для внутренних работ
• 3 Как покрасить OSB
  • 3.1 Подготовительные работы
    • 3.1.1 Шлифовка
    • 3.1.2 Заполнение неровностей шпаклевкой
    • 3.1.3 Покрытие грунтовкой
  • 3. 2 Процесс окрашивания
    • 3.2.1 Кроющие эмали
    • 3.2.2 Прозрачные покрытия
    • 3.2.3 Тонировка
    • 3.2.4 Огнебиозащита
  • 3.3 Сушка покрашенной OSB-плиты
• 4 Особенности декоративного окрашивания
  • 4.1 Эффект искусственного состаривания
  • 4.2 Имитация каменной поверхности
  • 4.3 Эффект штукатурки
• 5 Несколько слов в завершение

Особенности ОСБ-плит, влияющие на выбор краски

OSB (Oriented Strand Board) – ориентированно стружечная плита – представляет собой листовой материал, изготовленный методом горячего прессования древесной стружки крупной фракции, смешанной с клеевым составом. ОСБ или ОСП-плиты имеют ярко выраженную и шероховатую фактуру, что не играет роли при проведении строительных работ, но составляет проблему для отделочников. Чаще всего этот материал декорируют путем окрашивания, но прежде чем выбрать краску, нужно учесть некоторые важные моменты:

• некоторые лакокрасочные материалы (ЛКМ) могут плохо или неравномерно ложиться на поверхность OSB из-за плохой адгезии либо из-за того, что панель была обработана специальной пропиткой, образовавшей плёнку;
• не рекомендуется использовать красящие составы на водной основе, поскольку избыток влаги может привести к набуханию ОСБ-плиты;
• шероховатость и пористость поверхности приводит к увеличенному расходу краски, а значит, требуется предварительная подготовка материала перед окрашиванием;
• если даже после тщательной подготовки ОСБ-панелей краска на них ложится плохо, значит они хранились на улице более года без надёжной защиты. В этом случае требуется повторная качественная очистка и обработка поверхности антисептическими составами.

ФОТО: masteravsetut.ruOSB-плиты становятся все более универсальным материалом ФОТО: kartinkin.netОСБ имеет ярко выраженную фактуру 

Какие краски применяются для покраски OSB-плит

Краски для декорирования OSB-плит нужно подбирать не только по цвету, но и по эксплуатационным характеристикам. В зависимости от того, где будут установлены панели, для их окрашивания нужно использовать ЛКМ для внешних (фасадных) или внутренних работ.

ФОТО: obalkonah.ruДля ОСБ можно использовать те же краски, что и для натуральной древесины

Составы для наружных работ

К лакокрасочным составам, применяемым для окрашивания наружных стен дома, предъявляются жёсткие требования. Фасадные краски должны быть устойчивы к воздействию УФ-лучей, атмосферных осадков, экстремально низких и высоких температур, а также их резких перепадов. При нанесении ЛКМ на ОСБ-плиту снаружи здания следует придерживаться инструкции-компании производителя.

Для окрашивания OSB-панелей, используемых на улице, подходят следующие виды красок:

1. Масляные. Это самый надёжный вариант, поскольку краска имеет вязкую консистенцию и слабо впитывается в ОСБ-плиту. Несмотря на то, что этот тип ЛКМ долго сохнет, он создаёт прочный защитный слой с прекрасными эксплуатационными характеристиками.
2. Алкидные. Эти краски глубоко проникают в структуру материала, создают прочное покрытие, отличаются долговечностью и устойчивостью к низким температурам. Их недостаток – неустойчивость к щелочам и быстрое воспламенение.
3. Акриловые. ЛКМ данного типа отлично скрывают неровности поверхности, обеспечивают равномерность покрытия и прочную защитную плёнку. Акриловые краски не растекаются, быстро сохнут, долго сохраняют свой цвет даже под воздействием УФ-лучей. После окрашивания поверхность ОСБ-плит приобретает надёжную защиту от влаги и перепадов температур, их можно легко мыть и очищать.
4. Силиконовые. Подобные составы стоят дорого, но идеально подходят для отделки ОСБ-плит, монтируемых снаружи здания. Силиконовые краски устойчивы к механическому воздействию, влаге, растрескиванию и выгоранию. К тому же они могут наноситься поверх другого лакокрасочного слоя.
5. Морилка. Этот тип ЛКМ подходит для наружных работ, и хотя он не скроет текстуру ОСБ-плит, то по крайней мере сделает вид фасада более интересным. Для лучшей защиты поверхности после высыхания её нужно вскрыть прозрачным лаком.
6. Спецсоставы с УФ-фильтрами. В принципе, это обычные лаки на масляной, акриловой или водной основе. Основой таких составов обычно являются алкидные смолы, лаки с акрилом имеют матовую или полуматовую поверхность. ЛКМ на водной основе придаёт поверхности глянец.

ФОТО: sargorstroy.ruСовременные производители предлагают специальные фасадные краски для OSB-панелей

Составы для внутренних работ

Выбирая краску, которая будет применяться при проведении внутренних отделочных работ, нужно учитывать требования экологической безопасности, поскольку не все составы безвредны для здоровья человека. Для окрашивания ОСБ-плит, которые изготавливаются из отходов древесины, подходят лакокрасочные материалы, пригодные для обработки натурального дерева:

1. Акриловая краска. Отлично подходит для окрашивания стен и пола внутри помещений, обеспечивая однородное ровное покрытие.
2. Алкидные составы. Глубоко проникают в материал, создавая прочную влагостойкую плёнку. После покрытия алкидной краской не требуется дополнительная обработка лаком. Минус – лёгкое воспламенение.
3. Латексная краска. Это влагостойкий состав с теплоизоляционными свойствами, быстрым высыханием и безопасный для здоровья. Однако латексная краска дорого стоит, неустойчива к низким температурам и не предотвращает появление грибка и плесени.
4. Морилка и лак. Эта комбинация позволяет получить эффект состаренной древесины и тонкое прочное покрытие.
5. Лессирующие лазури. Это прозрачный ЛКМ, наносящийся тонким слоем, придающий древесине определённый оттенок и сохраняющий его текстуру.

Также для обработки плит ОСБ могут применяться масляные краски и бесцветный лак.

ФОТО: premiera.kzЛазури – неплохой вариант для внутренней отделки ОСБ-плит 

Как покрасить OSB

Получение качественного и долговечного лакокрасочного покрытия – сложный процесс, состоящий из подготовительных работ, непосредственного окрашивания и сушки.

ФОТО: strojdvor.ruОкраска ОСБ – сложный и длительный процесс 

Подготовительные работы

Для того чтобы лакокрасочное покрытие на панели ОСБ было качественным, прочным, равномерным и долговечным, необходима соответствующая предварительная подготовка материала к окрашиванию. Не рекомендуется декорировать OSB-плиты до монтажа, поскольку всё равно потребуется подгонка стыков, их обработка шпаклевкой и шлифовкой. Разберём все этапы подготовительных работ.

ФОТО: город-мичуринск.рфЧтобы получить качественное покрытие, нужны подготовительные работы 

Шлифовка

Первый этап подготовительных работ перед окрашиванием ОСБ-плиты – очистка поверхности от загрязнений при помощи ручной шлифовальной машинки. Для сохранения фактуры следует выбирать наждачную бумагу средней зернистости, примерно Р120, чтобы удалить защитный слой. Если требуется гладкая поверхность, то для начала нужно пройтись крупной наждачной бумагой (Р80), а затем мелкозернистой (Р200 и выше).

Удаление защитного слоя OSB-плиты позволяет грунту или краске легко проникнуть вглубь древесно-стружечного материала.

ФОТО: kraski-net.ruЧтобы лакокрасочный состав лёг качественно,  нужно хорошо отшлифовать панель

Заполнение неровностей шпаклевкой

Для получения качественного лакокрасочного покрытия на ОСБ-плит, помимо шлифовки, требуется заделать различные неровности на поверхности материала. Для этого используется масляно-клеевая шпатлевка. Шпатлевать стыки и швы между плитами не стоит, поскольку их всё равно не получится скрыть и после окрашивания они будут заметны. Оптимальный вариант – обыграть их при помощи декоративных планок или уголков, а также грамотно смонтировать панели, не допуская хаотичного расположения швов.

Важно! Выбирая OSB-плиты, стоит покупать материал с полным отсутствием или минимальным содержанием древесной коры, поскольку в процессе эксплуатации она часто отслаивается, а это портит общий внешний вид.

ФОТО: sk-resultat.ruШпатлевка стыков и неровностей – важный этап отделки

Покрытие грунтовкой

Заключительный этап подготовительных работ перед окрашиванием OSB-плит – грунтовка поверхности акриловым, полиуретан-акриловым или алкидным лаком. Выбор грунтовки зависит от основы ЛКМ, который будет использоваться для окрашивания панелей. Используя в качестве грунта лак на водной основе, необходимо развести его с водой в соотношении 1:10.

Помимо этого, используются адгезионные грунтовки, предназначенные для изоляции плит от лакокрасочного покрытия и предотвращения проступания смол на поверхность OSB.

ФОТО: 1pofasady.ruГрунтовка позволяет уменьшить расход краски 

Процесс окрашивания

После того как ОСБ-плита подготовлена, можно переходить к её непосредственному окрашиванию. Важно соблюсти порядок действий:

1. Вначале краска наносится по периметру панели при помощи малярной кисти. Необходимо пройтись по кромке 2–3 раза.
2. Далее красится поверхность материала валиком. Окрашивание необходимо выполнять, двигаясь в одном направлении.
3. После сушки плиты при равномерной температуре и без сквозняков спустя 8 часов можно нанести второй слой ЛКМ. Для сохранения текстуры нужно, чтобы слои краски или лака были максимально тонкими. Более толстое лакокрасочное покрытие будет обеспечивать идеально ровную поверхность.

В зависимости от выбранного лакокрасочного материала можно получить красивую поверхность с различным декоративным эффектом.

ФОТО: pro-dachnikov.comОкрашивание OSB, в зависимости от выбранной краски, позволяет получить поверхность с разным эффектом

Кроющие эмали

Прежде чем окрашивать OSB-плиты, используемые внутри или снаружи дома на даче, необходимо определиться с видами ЛКМ, способными скрыть фактуру материала. Выделяют следующие краски и эмали:

1. Латексные. Отличаются высокой устойчивостью к влаге, поэтому являются хорошим вариантом для зданий, расположенных поблизости от воды. Этот вид краски имеет неплохую укрывную способность, нетребователен к состоянию поверхности и выдерживает многократные замерзания.
2. Водорастворимые или акриловые. Являются оптимальным вариантом для окрашивания ОСБ-плит: они имеют доступную цену, воздухопроницаемы, выдерживают воздействие влаги и УФ-лучей, а также температурные перепады. Могут применяться зимой, но их нельзя использовать при температуре ниже -20 °C.
3. Пентафталевые. Отличаются высокой вязкостью и адгезией, образуют плотную и гладкую плёнку. Краска почти не впитывает влагу, имеет отличную укрываемость и низкий расход. Не предназначена для наружных работ и долго сохнет, а также неустойчива к воздействию влаги и солнечных лучей.
4. Алкидные. Отличный вариант для фасадных работ, поскольку этот вид краски образует прочную влагостойкую плёнку и не изменяет цвет под воздействием УФ-лучей. Благодаря тому, что данная разновидность ЛКМ способна выдерживать большие перепады температур, она подходит для любых регионов России.
5. Силиконовые. Данный вид краски полностью отвечает требованиям, предъявляемым к фасадам, устойчив к воздействию влаги, механическим воздействиям и появлению микротрещин. Подходит для отделки ранее окрашенных плит. Единственный недостаток – высокая стоимость.

Не рекомендуется использовать водно-дисперсионные краски для декорирования OSB-панелей, поскольку они могут деформироваться.

ФОТО: 02.img.avito.stКроющие эмали позволяют скрыть фактуру материала 

Прозрачные покрытия

Чтобы при окрашивании OSB-плит сохранить их текстуру и фактуру, используют прозрачные лакокрасочные материалы с УФ-фильтрами, стабилизаторами и водоотталкивающими компонентами на основе алкидных смол. Они применяются для наружных и внутренних работ и обеспечивают надёжную защиту от негативного воздействия окружающей среды.

Для сохранения первоначального внешнего вида панелей используют следующие составы:

• пропитки – обеспечивают качественную защиту;
• лазури – наиболее эффективный вариант, придают блеск поверхности и сохраняют текстуру материала;
• лаки – создают глянцевое покрытие и защищают от воздействия влаги.

ФОТО: kraski-net.ruЛак сохранит текстуру панелей и создаст прочное защитное покрытие

Тонировка

Морилка отлично подчёркивает текстуру натуральной древесины, сохраняет её природный рисунок, а также обеспечивает надёжную защиту от влаги и солнечных лучей. Необходимый оттенок получается путём добавления ацетона, растворителя или воды. Разбавленная морилка высыхает в течение 5–10 минут. Наносится краскопультом/кисточкой, а сверху накладывается слой полиуретанового грунта.

ФОТО: masteravsetut.ruМорилка чаще всего используется для окрашивания материалов из натуральной древесины 

Огнебиозащита

Окрашивание панелей OSB выполняется не только с целью придания эстетичного внешнего вида, но и для улучшения эксплуатационных характеристик материала. Ориентировано-стружечная плита при горении выделяет едкий и токсичный фенольный дым, который очень опасен для здоровья человека, поэтому материал требуется покрывать огнебиозащитными составами, особенно если ОСБ будет монтироваться внутри помещений.

Для защиты плит используются специально разработанные краски, которые придают материалу эстетичный вид и антипиреновые свойства, а также продлевают срок эксплуатации. Они отличаются высокой укрывной способностью, со временем не теряют первоначальный цвет и защищают ОСБ панели от гниения и появления плесени.

ФОТО: st24.stblizko.ruOSB нуждается в антипиреновой и антибактериальной защите

Сушка покрашенной OSB-плиты

После нанесения основного слоя краски необходимо дать время ему высохнуть, после чего выполнить повторное окрашивание. Сушка финишного слоя происходит естественным путем при соблюдении постоянной температуры, которая рекомендуется фирмой-производителем. Помимо того, в помещении, в котором сохнут выкрашенные ОСБ-панели, не должно быть сквозняков, а влажность воздуха не должна превышать 60%.

ФОТО: 1.bp.blogspot.comОблицовка из ОСБ-плит должна сохнуть при стабильной температуре и без сквозняков

Особенности декоративного окрашивания

Как бы тщательно ни подготавливалась и ни шлифовалась ОСБ-плита, полностью скрыть её характерную фактуру и рисунок при помощи обычной краски не получится. К тому же такой декор подойдёт не для каждого интерьера. Однако существует несколько способов выполнить декорирование панелей и получить оригинальный эффект старой поверхности, штукатурки и каменной кладки.

ФОТО: fasad-exp.ruКраской можно добиться интересных эффектов на поверхности панелей

Эффект искусственного состаривания

Чтобы получить эффект старой поверхности, нужно использовать специальные лаки и патину. Этот способ даёт возможность сгладить сильные выступы с сохранением первоначальной фактуры и текстуры. Для получения эффекта состаренной поверхности плита шлифуется, после чего наносится грунт с барьерным составом. Далее панель покрывается пигментной грунтовкой, после высыхания шлифуется и затем наносится патина. После высыхания патину тоже нужно прошлифовать, чтобы получить чёткую текстуру древесины. Завершается декорирование окрашиванием в выбранный цвет при помощи акрилового лака. При желании можно получить матовую или глянцевую поверхность.

ФОТО: zalpstroy.ruОСБ-панель с эффектом патины

Имитация каменной поверхности

Данная технология требует большого количества времени и терпения, поскольку декорирование под природный камень подразумевает многослойное окрашивание. В первую очередь выбирается изображение каменного узора, желательно не слишком замысловатое, и наносится на декорируемую поверхность. Далее плита обрабатывается грунтом с базовым оттенком, обычно светлым. Поверхность ОСБ-плиты шлифовать не нужно, а краску лучше всего наносить краскопультом.

После высыхания краски поверхность плиты нужно слегка отшлифовать, чтобы подчеркнуть и сделать более глубокой фактуру материала. Теперь можно карандашом нанести на ОСБ контур каменной кладки, который закрепляется более тёмной краской. Далее отдельные «камни» для придания объема тонируются другими оттенками. При необходимости можно обновить контур, а после высыхания краски покрыть всю поверхность лаком.

ФОТО: masteravsetut.ruИмитация каменной кладки на полу из ОСБ-плит

Эффект штукатурки

Очень популярный вариант декорирования OSB-плит. Для создания эффекта штукатурки потребуется прошлифовать для снятия защитного воскового слоя и прогрунтовать пиломатериал, после чего нанести краску желаемого цвета. Когда поверхность высохнет, вновь отшлифовать её мелкозернистой наждачной бумагой. Для большей эффектности можно использовать перламутровый состав или патину. Завершающий этап – покрытие облицовки прозрачным или оттеночным лаком.

ФОТО: soppka.ruДля создания эффекта штукатурки на OSB-панелях производители даже разработали специальный состав 

Несколько слов в завершение

Плиты OSB – удобный и практичный материал, пригодный для различных отделочных работ, однако его внешний вид не очень эстетичен. Проблема решается декорированием панелей и способ зависти от личных предпочтений владельца дома или квартиры. Надеемся, что информация, представленная в данной статье, поможет, когда вы решите использовать плиты ОСБ для отделки стен, пола или фасада в своём доме.

Окрашенные ОСБ (ориентированно-стружечные плиты)

• Срок хранения:   2 года
• Страна:   Россия
• Поверхность:   Дерево
• Область применения:   Стены, Потолок, Фасады

Окрашенные ОСБ (ориентированно-стружечные плиты)

OSB (ОСБ или ориентированно-стружечные плиты) – многослойный листовой материал из древесной стружки, которая склеена между собой смолами, причем в каждом слое стружка ориентирована особым образом. В наружных слоях – стружка OSB имеет продольную ориентацию, во внутренних – поперечную. ОСБ широко применяются в строительстве и ремонте как во внутренней, так и наружной отделке жилых и промышленных помещений. Из OSB строят каркасные дома, делают сплошное основание под мягкую кровлю, обшивают стены и черновые полы. При финишной отделке стен, фасада или пола для придания эстетического вида, возможно различное декорирование ОСБ — это может быть, например в случае с внешними стенами, обшивка каркаса дома сайдингом или если фасад решают оставить обшитым этим материалом имеет смысл просто защитить его от внешних атмосферных воздействий покрасив защитным составом — краской или эмалью.

С учетом того, что весной этого года плиты ОСБ подорожали в разы, вариант финишной отделки плит окрашиванием становится гораздо привлекательнее с точки зрения затрат на строительство, чем, например, дорогостоящая дополнительная работа по обшивке фасада сайдингом, в данном случае владелец сразу получает законченный и красивый фасад, который прослужит ему долгие годы не требуя к себе внимания.

Конечно, окрашивание плит ОСБ можно производить и после их монтажа, но гораздо удобнее монтировать их будучи уже окрашенными в необходимый для вас цвет. Все, что останется сделать после монтажа окрашенных ОСБ — просто обработать стыки и места крепежа.

Ориентированно-стружечные плиты на 90% состоят из дерева и 10% из смолистых связующих компонентов. Этот материал может легко изменяться в объеме, реагируя на изменения влажности и температуры. Поэтому монтаж листов выполняют с соблюдением зазоров, а для заделки швов в стыках используют эластичные составы. Самые уязвимые участки плит – это торцы. Они начинают разбухать от влаги в первую очередь и подвергаются биопоражению. Для защитной заделки швов отлично подойдет герметик Poli-R силиконизированный для дерева. Он с легкостью загерметизирует стыки и влагоизолирует. Он эластичен, устойчив к образованию плесени и грибка, не боится солнечного света, имеет высокие тепло- и влагоизоляционные свойства.

Окраска ОСБ

Состояние ОСБ окрашенного Elast- R через 4 года эксплуатации снаружи помещения без заполнения стыков герметиком

Алкидные эмали. Современные алкидные эмали и специализированные краски на алкидной основе для деревянных панелей. Они глубоко проникают в структуру плиты и служат долго. Окрашенные алкидными красками стены не нужно покрывать сверху защитным лаком – это существенно снижает расходы на отделку.

Акриловые краски. Они хорошо укрывают неровности и позволяют добиться равномерного тона. Если обработать наружные стены грунтовкой, устойчивой к воздействию плесени, можно покрасить их качественными водостойкими акриловыми красками.

Морилка + лак. Если вы предпочитаете натуральную фактуру ОСБ плиты, воспользуйтесь идеей, популярной у дизайнеров. Они советуют использовать морилку или составы с эффектом патины для придания нужного оттенка, а затем покрывать поверхность плиты лаком, виниловым или на основе полиуретана.

Сверхстойкое эластичное покрытие Elast- R. Идеальное покрытие для обработки ОСБ, которое будет использоваться снаружи помещений и подвергаться агрессивному воздействию атмосферы и солнечных лучей. Это покрытие не боится атмосферных воздействий, чрезвычайно эластично (800%), гидроизолирует и выдерживает долгий контакт с водой, не боится резких перепадов температур от -40°С до +150°С. Идеальный вариант для отделки фасада дома.

У нас вы можете заказать OSB толщиной 9 или 12 мм, окрашенное сверхстойким эластичным покрытием Elast-R в два слоя с одной стороны. Срок исполнения 2 недели с момента заказа на сайте или по телефону.

После монтажа окрашенных плит ОСБ рекомендуем обработать стыки герметиком Poli-R для дерева и места крепежа прокрасить краской Elast-R.

На выбор покупателям мы готовы предоставить яркие оригинальные цвета, которые придадут вашему дому неповторимый и уютный вид.

Если вы решите покрасить фасад при помощи сверхстойкого покрытия Elast-R самостоятельно, посмотрите этот ролик

Протокол отрицательного окрашивания электронного микроскопа при сыпи | Оспа

Загрузить: Протокол электронного микроскопа с отрицательным окрашиванием для сыпи Cdc-pdf[PDF – 10 страниц]

Введение

Электронно-микроскопическая (ЭМ) визуализация отрицательно окрашенных вирионов поксвируса была ценным методом для подтверждения инфекций поксвируса во время ликвидации оспы кампания. Исторически сложилось так, что отрицательное окрашивание ЭМ успешно выявляло частицы поксвируса примерно в 95% клинических образцов от пациентов с ортопоксвирусными инфекциями, такими как оспа (оспа)/обезьянья оспа, и примерно 65% от пациентов с коровьей оспой (вакцина против оспы). В случае преднамеренного высвобождения вируса оспы и последующего заболевания человека или при генерализованных инфекциях коровьей оспы, возникших в результате вакцинации, отрицательно окрашенные препараты, полученные из пораженных участков или струпьев, снова окажутся ценным методом, помогающим в диагностике поксвируса и/или исключении других причины сыпи болезни. Однако ЭМ-визуализация вирионов, совместимых с поксвирусом, сама по себе не является доказательством оспы, потому что различные поксвирусы, такие как вирусы натуральной оспы, коровьей оспы, обезьяньей оспы и моллюска (моллюскипоксвируса), морфологически неразличимы.

Хотя лаборатории ЭМ будут неотъемлемыми членами группы биоподготовки, необходимо рассмотреть несколько вопросов, прежде чем лаборатория ЭМ согласится обрабатывать образцы от пациентов с подозрением на поксвирусную инфекцию. В первую очередь следует учитывать диагностические возможности лабораторного персонала, который должен иметь опыт подготовки сеток ЭМ с отрицательным окрашиванием и, что более важно, должен иметь опыт анализа препаратов ЭМ с отрицательным окрашиванием для идентификации морфологии вируса и дифференциации их от двойников. и артефакты. Во-вторых, персонал ЭМ, который будет работать с образцами, должен быть недавно вакцинирован или не иметь противопоказаний к постконтактной вакцинации. Наконец, ЭМ-лаборатория должна иметь доступ к сдерживанию BSL-3 или к учреждению BSL-2, которое может использовать меры предосторожности BSL-3.

Лаборатории EM, занимающиеся вирусной диагностикой с отрицательным окрашиванием, приглашаются к участию в программе внешней оценки качества, проводимой Институтом Роберта Коха в Берлине. Тренинг называется «EQA-EMV (Внешняя схема обеспечения качества в электронно-микроскопической диагностике вирусов) — электронно-микроскопическая диагностика кольцевым тестом».

Отчетность и надлежащие действия

1. Клинические образцы перед событием с высоким уровнем подозрения на присутствие вируса натуральной оспы, как описано в Протоколе острой, генерализованной везикулярной или пустулезной сыпи, должны быть немедленно отправлены в CDC для специализированной диагностической оценки . В CDC будет проведено несколько тестов для подтверждения или исключения заражения оспой, учитывая, что положительный результат на оспу ускорит немедленные и обширные ответные меры общественного здравоохранения.
2. Подробная информация доступна на домашней странице CDC по оспе.

Материалы

Приемлемые образцы из поражений

• Везикулярная жидкость на ЭМ сетке
• Везикулярная жидкость в виде мазков на предметных стеклах
• Биопсия корок и тканей
• Тампоны
• Везикулярная жидкость в туберкулиновом шприце или другом собирательном устройстве

Эти устройства для сбора должны транспортироваться в герметичном пластиковом контейнере, чтобы избежать утечки. При использовании иглы и шприца необходимо соблюдать меры предосторожности. Проконсультируйтесь с местным офицером безопасности.

Реагенты

• Фосфорно-вольфрамовая кислота (рецепт см. в разделе «Реагенты для окрашивания негативных красителей»)
• Уранилацетат (см. рецепт в разделе «Реагенты для окрашивания негативных красителей»)
• Стерильная деионизированная вода (dH ₂ O)
• 1% Alcian Blue (Sigma Aldrich)
• 2% параформальдегид класса EM (Electron Microscopy Sciences), забуференный фосфатно-солевым буфером (PBS, pH 7,3)
• Свежеприготовленный коммерческий отбеливатель (гипохлорит натрия) в разведении 1:10

Расходные материалы

• Медные сетки 400 меш с формваровым углеродным покрытием (Electron Microscopy Sciences) (на этих сетках блестящая сторона покрыта пластиком.)
• Ящик для хранения сетки (Electron Microscopy Sciences)
• Парафильм
• Шприц 1 мл (для шага II. B.9.)
• Шприцевые фильтры (для шага II.B.9.)
• Набор пестиков и насадок для измельчения (Fisher Scientific)
• Система пробирок для взятия мазков (Roche Applied Science)
• Микроцентрифужные пробирки с уплотнительным кольцом
• Марлевая подушечка, смоченная в свежеприготовленном растворе коммерческого отбеливателя 1:10
• Дополнительно, для альтернативной подготовки мазков (см. шаг I.D.2.): конические центрифужные пробирки, пластиковые, 15 мл; Шприц, пластиковый, 3 мл; Деревянная палочка-аппликатор
• При необходимости для УФ-облучения и инактивации отбеливателя (см. этап III.A.): чашки Петри, пластиковые, 60 х 15 мм и 100 х 15 мм; Бумага фильтровальная, круглая, 55 мм.

Оборудование

• Трансмиссионный электронный микроскоп
• Пинцет, класс EM (примеры: Ted Pella, Inc. и Electron Microscopy Sciences)
• Микроцентрифуга (см. этап I.C.3.)
• Настольная центрифуга (см. шаг I. D.2.(f))
• Дополнительно, для концентрации вируса (см. шаг I.F.): Airfuge (Beckman Instruments)
• Дополнительно, для альтернативной подготовки сетки (см. шаг II.A.2.): Блок тлеющего разряда и вакуумный насос (Ted Pella, Inc.). В качестве альтернативы, установка тлеющего разряда может быть сконструирована в лаборатории по схеме, описанной Эби и Поллардом (см. Ссылки).
• При необходимости для УФ-облучения и инактивации отбеливателя (см. шаг III.A.): бактерицидные ультрафиолетовые лампы серии E, подставка для лампы, УФ-метр, УФ-очки (Spectroline)

Materials Sources

Beckman InstrumentsExternal Tel: (800) 742-2345

Electronic Microscopy SciencesExternal Tel: (800) 523-5874

Fisher ScientificExternal Tel: (800) 766-7000 Roche Applied ScienceExternal Tel: (800) 766-7000

03 Science ) 262-1640

Sigma-AldrichВнешний телефон: (800) 325-3010

SpectrolineExternal Тел.: (800) 274-8888

Ted Pella, Inc.Внешний тел. : (800) 237-3526

Отказ от ответственности:

Названия поставщиков или производителей приведены в качестве примеров подходящих источников продукции; включение не означает одобрения Центрами по контролю и профилактике заболеваний или Министерством здравоохранения и социальных служб.

Процедура отрицательного окрашивания

Реагенты для отрицательного окрашивания

• 2% фосфорно-вольфрамовая кислота (PTA):
  • 2 г фосфорновольфрамовой кислоты в 100 мл dH ₂ 0
  • рН до 7,0 с КОН
  • Хранить при температуре от 2 до 8°C
• 0,5% ацетат уранила (UA):
  • 0,5 г уранилацетата в 100 мл dH ₂ 0
  • Оставить на ночь
  • Хранить при температуре от 2 до 8°C в темном месте

1. Подготовка образцов
   Со всеми незафиксированными материалами из образцов высокого риска следует работать в BSL-3.
   Примечание. По возможности подготовьте не менее 2 сеток на образец. Если материал на ЭМ сетке слишком плотный, разбавьте образец dH ₂ O и сделайте новые сетки.

1. Везикулярная жидкость на сетках ЭМ, предварительно приготовленных методом прямого касания:
   1. Перейдите к шагу II.B.9.
2. Везикулярная жидкость в виде мазков на предметных стеклах:
   1. Добавить 1-2 капли стерильного dH ₂ 0.
   2. Соскребите сухой материал для ресуспендирования.
   3. Сделайте ЭМ сетки прямо из этого материала (см. шаг II.)
   4. Перенесите оставшуюся жидкость в микроцентрифужную пробирку для хранения/дальнейшего тестирования.
3. Биопсия корок и тканей (используйте пестик и трубку-измельчитель):
   1. Поместите корку в пробирку измельчителя тканей и добавьте 1 мл стерильного dH ₂ 0.
   2. Измельчить до получения опалесцирующей суспензии.
   3. Центрифуга при 1000 x г в течение 5 минут.
   4. Используйте супернатант в качестве образца для этапа II.
4. Тампоны
   1. Либо , следуйте указаниям для системы трубок для взятия тампонов (Roche)
   2. или следуйте альтернативным процедурам (ниже):
      1. Поместите мазок в коническую пробирку объемом 15 мл, содержащую приблизительно 0,3 мл стерильного dH ₂ 0.
      2. Замочить на 10-15 минут.
      3. Деревянной палочкой-аппликатором соскребите остатки образца с ватного тампона прямо в dH ₂ 0.
      4. Временно удалите тампон из центрифужной пробирки. Поместите цилиндр только 3-кубового шприца в коническую пробирку объемом 15 мл, затем поместите тампон в цилиндр шприца. Отломить палку. Завинтить крышку для предотвращения аэрозолизации.
      5. Поместите коническую пробирку в канистру центрифуги с ротором с аэрозольным барьером.
      6. Центрифуга при 2000 x г в течение 20 минут.
      7. Поместите всю канистру центрифуги обратно в BSC. Снимите коническую трубку с канистры.
      8. Извлеките и выбросьте тампон и цилиндр шприца в мусорную корзину, содержащую коммерческий отбеливатель в разведении 1:10.
      9. Ресуспендируйте любой осадок. Используйте полученную жидкость в качестве образца для шага II.
5. Везикулярная жидкость в коллективных устройствах (например, шприце, капиллярной трубке и т. д.)
   1. Вылейте жидкость в микроцентрифужную пробирку.
   2. Поместите две капли образца от 2 до 5 мкл на лист парафильма. (Сохраните оставшуюся жидкость для дополнительных испытаний.)
   3. Разбавьте каплю 2 ^nd , добавив равное количество dH ₂ 0 и перемешав.
   4. Перейдите к шагу II.
   5. Сохраните оставшийся образец в микроцентрифужной пробирке для хранения/дальнейшего тестирования.
6. Концентрация вируса (опционально):
   1. Если возможно, для концентрирования вируса в образцах, полученных на этапе I. B.3, можно использовать аэрацию. (везикулярная жидкость в виде мазков на предметных стеклах), этап I.C.4. (корки и биопсии тканей) и шаг I.D.1. Или I.D.2.(i). (мазки).
   2. Образцы центрифугируют при 30 фунтов/дюйм ² в течение 30 минут, сливают надосадочную жидкость в кювету для отходов, содержащую свежеразбавленный раствор хлорной извести, ресуспендируют осадок в 10–20 мкл dH ₂ 0 и используют жидкость в качестве образца для этапа II. .  

2. Обработка сетки ЭМ методом «капля-капля»
   По возможности сделайте как минимум 2 сетки образцов.
   1. Повышение гидрофильности ЭМ сеток:
      1. Поместите сетки с пластиковым/углеродным покрытием (пластиковой стороной вниз) на каплю 1% Alcian Blue на 5 минут, затем промойте 3 каплями dH ₂ O.
      2. В качестве альтернативы, если возможно, используйте обработку тлеющим разрядом на сетках непосредственно перед нанесением сетки на каплю образца.

   Метод

   2. Drop-to-Drop (см. рис. 1):
      1. Поместите 5 мкл жидкого образца на лист парафильма.
      2. ПРИМЕЧАНИЕ. Во избежание перекрестного загрязнения используйте разные пинцеты для каждого образца.
      3. Поместите медную сетку 400 меш с пластиковым/углеродным покрытием (пластиковой стороной вниз) на каплю и дайте впитаться в течение 10 минут.
      4. Удалите лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
      5. Поместите сетку в большую каплю забуференного 2% параформальдегида на 5 минут.
      6. Удалите лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
      7. Ополаскиватель с 2 каплями dH ₂ O.
      8. Удалите лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
      9. Пятно.
         1. Красители можно хранить в шприцах объемом 1 мл, оснащенных шприцевыми фильтрами. Накрыть шприц с 0,5% УК фольгой для защиты от света.
         2. Поместите сетку (пластиковой стороной вниз) на каплю отфильтрованного 2% PTA, pH 7,0, и оставьте окрашиваться примерно на 30 секунд.
         3. Если имеются 2 сетки для образцов ^и , окрашивайте отфильтрованным 0,5% UA в течение приблизительно 30 секунд.
      10. Удалите лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
      11. Если вы переходите к шагу III.A., поместите сетки на дно пластиковой чашки Петри размером 60 x 15 мм, содержащей круглую фильтровальную бумагу. В противном случае перейдите к шагу III.B.

Рис. 1. Иллюстрация метода «капля-капля», описанная в разделе II.B, для предварительно зафиксированных образцов.
Адаптировано из FW Doane and N Anderson, Электронная микроскопия в диагностической вирусологии.

3. Деактивация
   Примечание. Деактивируйте решетки в Кабинете биологической безопасности.
   1. Инактивация УФ-излучением и хлорной известью (см. рис. 2)
      Примечание. Эти этапы с использованием УФ-облучения и хлорной извести необходимы только для образцов, которые были определены как представляющие высокий риск заражения вирусом натуральной оспы. (Пожалуйста, обратитесь к разделу «Диагностика и оценка» для получения дополнительной информации об оценке риска образцов.) Они используются для обеспечения инактивации любых вирусных частиц, в том числе на фильтровальной бумаге или снаружи чашки Петри.
      1. Добавьте свежеприготовленный коммерческий отбеливатель в разведении 1:10 в чашку Петри размером 100 x 15 мм, чтобы покрыть дно чашки (примерно 50 мл).
      2. Поместите дно чашки Петри для образцов (с сетками) в большую чашку.
      3. Поместить под УФ-свет (длина волны 254 нм) и облучать в течение 10 минут.
      4. Переверните сетки и облучайте еще 10 минут.

Рисунок 2: УФ-облучение и инактивация отбеливателем (см. этап III.A.). Изображение оборудования, описанного на этапе III.A, используемого для инактивации образцов с помощью УФ-облучения и инактивации отбеливателем.

2. 2. Используя чистый пинцет , поместите сетки в ящик для хранения сеток. Внимательно запишите, какой слот используется для каждого образца пациента. Все использованные ЭМ-пинцеты должны быть продезинфицированы марлей, пропитанной раствором хлорной извести 1:10.

Интерпретация результатов

Поксвирусы, за исключением парапоксвирусов

Размер вирионов составляет примерно 225 X 300 нм, они выглядят прямоугольными или кирпичообразными при осмотре в продольном направлении и круглыми или овальными при осмотре сбоку. В зависимости от проникновения пятна можно увидеть две формы. У формы «М» (или «тутовой») поверхность покрыта короткими мутовчатыми нитями, а в центре вириона иногда видно круглое углубление. В частицах, пронизанных красителем, формы «С» или («капсульной») поверхностные филаменты не видны; вместо этого вирион состоит из четко очерченного плотного ядра, окруженного несколькими слоистыми зонами разной плотности. Кроме того, иногда встречаются оболочечные частицы.

Рисунок 3: ЭМ вируса коровьей оспы из культуры ткани (A). ЭМ вируса коровьей оспы из клинического образца (В). ЭМ вируса оспы обезьян из клинического образца (С). Обратите внимание, что в клинических образцах морфология может быть менее отчетливой, чем в образцах тканевых культур.

Рисунок 4: ЭМ вируса оспы птиц, образец культуры ткани, демонстрирующий 3 вириона с формой «C» (A). ЭМ танапоксвируса, клинический образец (вирион с оболочкой) (Б).

Парапоксвирусы (например, Orf)

Частицы парапоксвируса выглядят более яйцевидными, чем другие поксвирусы, а поверхностные нити имеют спиральное или крест-накрест расположение. Размер частиц составляет примерно 150 X 200 нм.

Рис. 5. ЭМ парапоксвируса (вируса Orf) из культуры ткани (A) и клинического образца (B). Электронно-микроскопические изображения вируса парапокса из культуры ткани и клинического образца.

Вирусы герпеса (например, вирус ветряной оспы, вирусы простого герпеса типа 1 и типа 2)

Голый нуклеокапсид диаметром около 100 нм состоит из икосаэдра, образованного полыми капсомерами. Нуклеокапсиды, пропитанные красителем, могут иметь вид шестиугольника, окруженного полыми капсомерами. Оболочечные вирионы можно идентифицировать, когда краситель проникает через вирусную оболочку и очерчивает нуклеокапсид.

Рисунок 6: Два изображения частиц вируса герпеса из культуры ткани. Оболочечные вирионы (А). Голые нуклеокапсиды, окруженные полыми капсомерами (В).

Рис. 7. Два изображения вируса герпеса из клинических образцов. Герпесвирус из клинических образцов. Обратите внимание, что в клинических образцах морфология может быть менее отчетливой, чем в образцах тканевых культур.
Обратите внимание, что в клинических образцах морфология может быть менее четкой, чем в образцах тканевых культур.

Меланосомы

Необходимо соблюдать осторожность, чтобы отличить частицы поксвируса от этой похожей структуры, обнаруживаемой в нормальной коже. Меланосомы находятся в эпидермисе кожи и волосяных луковицах и имеют диаметр около 370 нм и длину от 0,7 до 1,15 мкм.

Рис. 8: Два ЭМ-изображения меланосом.

Ссылки

Abei U и Pollard TD . Устройство тлеющего разряда для придания гидрофильности электронно-микроскопическим сеткам и другим поверхностям. Внешний вид. Журнал методов электронной микроскопии. 1987;7:29-33.

Центры по контролю и профилактике заболеваний. Оспа.

Gelderblom HR и Hazelton PR. Сбор препаратов для электронной микроскопииCdc-pdfExternal. Новые инфекционные заболевания. 2000;6(4):433-434.

Long GW, Nobel J, Murphy FA, ​​Herrmann KL и Lourie B. Опыт использования электронной микроскопии в дифференциальной диагностике внешней оспы. Прикладная микробиология. 1970;20(3):497-504.

Миллер SE. Биотерроризм и электронно-микроскопическая дифференциация поксвирусов от герпесвирусов: можно и нельзя внешний. Ультраструктурная патология. 2003; 27:133-140.

Накано Дж.Х. Поксвирусы. Леннетт Э. Х. и Шмидт Н. Дж. , редакторы. Диагностические процедуры при вирусных, риккетсиозных и хламидийных инфекциях, 5 ^-е изд. Вашингтон, округ Колумбия: Американская ассоциация общественного здравоохранения . 1979; стр. 257-308.

Клинические заболевания | Оспа | CDC

Существует четыре основные клинические формы оспы, каждая со своими характеристиками. В эпоху оспы уровень летальности был разным для разных клинических форм, но в целом у непривитых лиц он составлял примерно 30%.

Обыкновенная оспа (Variola Major)

Обыкновенная оспа была наиболее распространенной формой, на нее приходилось более 85% всех случаев в эпоху оспы.

См. изображение обычной оспы ниже.

Инкубационный период

Заражение вирусом натуральной оспы начинается с инкубационного периода, обычно продолжающегося от 10 до 14 дней (от 7 до 19 дней). За это время у зараженного человека нет симптомов, он не заразен и может чувствовать себя нормально.

Продромальный период

Первые симптомы продромального периода начинаются после инкубационного периода и включают:

• Лихорадку от 101°F до 105°F (от 38,3°C до 40,5°C)
• Болезнь
• Прострация
• Головная боль
• Боль в спине
• Рвота
• Сильная боль в животе
• Озноб
• Анорексия
• Фарингит

Эта фаза длится около 4 дней. У пациентов с бледной кожей может быть видна эритематозная сыпь или редко петехиальная сыпь.

Эруптивная стадия

По мере снижения температуры начинают появляться высыпания. Поражения обычно появляются сначала на ротоглотке, затем на лице и конечностях, а затем распространяются на туловище, ладони и подошвы по центробежному типу распространения.

Поражения развиваются равномерно на протяжении всего заболевания и прогрессируют от пятен до папул и везикул в течение 4–5 дней. В течение следующих 1-2 дней везикулы часто пупкообразные и превращаются в пустулы, которые округлые, напряженные, твердые на ощупь и глубоко сидят в дерме. Поражения обычно демонстрируют одну и ту же стадию развития в любой области тела в любой момент времени.

Образование корок и струпьев обычно начинается на девятый день экзантемы. Корочки отпадают примерно через 14 дней после появления сыпи.

См. изображение Эруптивной стадии ниже.

Последствия

Оспины и рубцы являются наиболее частыми последствиями. Они являются следствием вирусопосредованного некроза и разрушения сальных желез. Рубцы могут возникать по всему телу, но наиболее обильны они на лице, где сосредоточено наибольшее количество сальных желез.

Другие последствия включают:

• Слепота является редким явлением и возникает в результате рубцевания роговицы после кератита или изъязвления роговицы. Как правило, это происходит при наличии недоедания и/или оппортунистической инфекции.
• Энцефалит
• Остеомиелит
• Мертворождения и самопроизвольные аборты
• Бесплодие (обструктивная азооспермия) у мужчин

Выздоровление от оспы дает пациенту длительный иммунитет к повторному заражению вирусом натуральной оспы. Вирус не сохраняется в организме после выздоровления.

См. изображение последствий ниже.

Оспа модифицированного типа

Оспа модифицированного типа возникает у ранее вакцинированных лиц. При этом типе продромальная стадия может по-прежнему состоять из сильной головной боли, болей в спине и лихорадки и может длиться так же долго, как и при обычном типе. Однако, как только появляются кожные поражения, они обычно развиваются быстрее, и образование корочек заканчивается в течение 10 дней, в отличие от 14 дней при обычной оспе. Также может быть меньше поверхностных поражений, чем при обычной оспе. Пациенты также не склонны к лихорадке во время развития сыпи.

См. изображение оспы модифицированного типа ниже.

Плоская (злокачественная) оспа

Плоская или злокачественная оспа встречается очень редко и характеризуется выраженной токсемией. Чаще встречается у детей. В отличие от обычной оспы кожные поражения при этом типе развиваются медленно, сливаются между собой, остаются плоскими и мягкими (часто описываются как «бархатистые» на ощупь). Они никогда не прогрессируют до пустулезной стадии.

Внешний вид поражений свидетельствует о недостаточном клеточном иммунном ответе на вирус натуральной оспы, и большинство случаев плоской оспы заканчиваются летальным исходом. Если пациент выживает, поражения постепенно исчезают, не образуя струпьев. Предварительная вакцинация защищает от оспы плоского типа.

См. изображение плоской (злокачественной) оспы ниже.

Геморрагическая оспа

Геморрагическая оспа встречается в любом возрасте и у обоих полов, но чаще у взрослых. Беременные женщины кажутся более восприимчивыми. Основные биологические причины этого типа неясны. Предварительная вакцинация не защищает. Этот тип отличается от обыкновенной оспы:

• Более коротким инкубационным периодом
• Более тяжелые продромальные симптомы с высокой температурой, сильной головной болью и болью в животе
• Развитие темной эритемы после начала заболевания с последующими петехиями и кровоизлияниями в кожу и слизистые оболочки

Смерть обычно наступает на 5 90 250 90 251 или 6 90 250 90 251 день появления сыпи, часто до появления характерных очагов оспы. Смерть наступает в результате глубокой токсемии, приводящей к полиорганной недостаточности.

См. изображение геморрагической оспы ниже.

Мужчина, больной оспой, с поражениями на верхней части туловища, руках, лице и шее. Источник: Барбара Райс из CDC.

Ноги больного оспой модифицированного типа. В характере их распределения наблюдается «обрезка» поражений. Сыпь напоминает ветряную оспу. Источник: доктор Робинсон из CDC.

Очаги оспы на туловище пациента в Бангладеш в 1973 году. Источник: Джеймс Хикс из CDC.

Женщина с плоской оспой на 6-й день сыпи. На изображении видны крепоподобные поражения на руках, кистях, шее и лице. Источник: Феннер Ф., Хендерсон Д.А., Арита И., Ежек З., Ладный И.Д. Оспа и ее искоренение. Женева, Швейцария: Всемирная организация здравоохранения; 1988 (стр. 33).

У этой матери и ребенка остались шрамы после перенесенной оспы. Рубцы соответствуют характеру распространения оспы. Источник: Стэнли О. Фостер из CDC.

Оспа позднего геморрагического типа у молодой женщины с кровотечением в основании пустул и развитием общего геморрагического диатеза на поздних стадиях заболевания (Источник: Herrlich A, Mayr A, Munz E, Rodenwaldt E.